L'analyse biologique de la thérapie génique est l'évaluation scientifique des produits de thérapie génique en termes de pharmacocinétique, pharmacodynamique, immunogénicité, sécurité et autres aspects in vivo. Les produits de thérapie génique sont un nouveau type de médicaments qui utilisent des gènes exogènes ou des techniques d'édition génétique pour traiter des maladies génétiques ou acquises, avec les caractéristiques d'une spécificité élevée, d'une longue durée et d'une efficacité potentielle. Actuellement, les produits de thérapie génique comprennent principalement l'ADN nu, l'ARN, le transfert de gènes à médiation vectorielle et l'édition de gènes.
Le transfert de gènes à médiation vectorielle consiste à utiliser des vecteurs viraux ou non-viraux pour délivrer le gène cible dans les cellules cibles, le faisant ainsi s'exprimer ou s'intégrer dans le génome hôte dans les cellules. Le transfert de gènes à médiation vectorielle est la méthode de thérapie génique la plus couramment utilisée et l'une des méthodes les plus prometteuses pour les applications cliniques. Parmi eux, le vecteur du virus adéno-associé (AAV) est un virus défectif à ADN simple brin non enveloppé-, présentant les avantages d'une sécurité élevée, d'une faible immunogénicité, d'une large gamme d'hôtes et d'une expression stable. Il est considéré comme l’un des vecteurs de thérapie génique les plus idéaux.
La stratégie bioanalytique pour les médicaments de thérapie génique basés sur l'AAV-doit être formulée en fonction de son mécanisme médicamenteux particulier et de ses caractéristiques. De manière générale, les aspects suivants doivent être pris en compte :
- Exposition au médicament : concentration ou nombre de copies du vecteur AAV et du gène cible dans le sang ou d'autres échantillons biologiques, reflétant la distribution et l'élimination du médicament in vivo. La méthode de PCR quantitative en temps réel (qPCR) est généralement utilisée pour la détection.
- Biodistribution : distribution du vecteur AAV et du gène cible dans différents tissus et organes, reflétant le ciblage et la spécificité tissulaire du médicament in vivo. La méthode qPCR ou d’hybridation in situ (ISH) est généralement utilisée pour la détection.
- Persistance et clairance : durée de survie et voie d'élimination du vecteur AAV et du gène cible in vivo, reflétant la stabilité et le métabolisme du médicament in vivo. La méthode qPCR ou ISH est généralement utilisée pour la détection.
- Excrétion virale : possibilité que le vecteur AAV soit excrété ou sécrété hors de l'organisme par le biais d'excréments ou de sécrétions, ce qui reflète le risque potentiel du médicament pour l'environnement et pour autrui. Habituellement, la méthode qPCR ou de test infectieux est utilisée pour la détection.
- Immunogénicité : possibilité que le vecteur AAV et le gène cible provoquent une réponse immunitaire dans l'organisme, reflétant l'impact du médicament sur le système immunitaire de l'organisme. Habituellement, la méthode ELISA ou électrochimiluminescence (ECL) est utilisée pour détecter les anticorps anti-AAV ou les anticorps anti-protéine cible, et la méthode ELISPOT ou cytométrie en flux est utilisée pour détecter la réponse immunitaire cellulaire.
- Toxicité immunitaire : possibilité que le vecteur AAV et le gène cible provoquent des réactions indésirables liées au système immunitaire-dans l'organisme, reflétant l'impact du médicament sur la sécurité de l'organisme. Habituellement, la méthode Bio-Plex ou ECL est utilisée pour détecter les cytokines ou les facteurs inflammatoires, et les méthodes hématologiques ou biochimiques sont utilisées pour détecter la fonction sanguine ou hépatique.
